Вт

08

ноя

2016

ЯГОДЫ ОБЛЕПИХИ СНИЖАЮТ ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС ТРОМБОЦИТОВ И ПЛАЗМЫ КРОВИ У ЧЕЛОВЕКА

облепиха антиоксидант

Фенольные соединения представляют собой вторичные метаболиты растений с антиоксидантными свойствами. Они играют важную роль в адсорбции и нейтрализации активных форм кислорода. Известно, что окислительный стресс плазмы и тромбоцитов играет негативную роль в развитии сердечно-сосудистых заболеваний и способствует ухудшению состояния здоровья при других болезнях. 

При проведении экспериментов с фенольными фракциями ягод облепихи, ученые из Университета Лодзи (Польша), обнаружили, что эти соединения способны: 
- снизить окислительный стресс тромбоцитов и плазмы крови человека 
- уменьшить перекисное окисление липидов 
- понизить количество тромбоцитов крови 
- регулировать метаболизм арахидоновой кислоты через ингибирование активности циклооксигеназы 

Эти результаты говорят о том, что фенольные соединения из ягод облепихи способны оказывать антиоксидантное, анти-тромботическое, анти-воспалительное, анти-склеротическое действие на кровь человека. Подобные свойства показывают на возможность применения облепихи, в разных формах в виде свежих ягод, настоек, масел, при разнообразных заболеваниях, в том числе и предотвращении или лечении злокачественных опухолей. 

 

ИССЛЕДОВАНИЕ (перевод автоматический без адаптации) 
Авторы: Кафедра общей биохимии, факультет биологии и охраны окружающей среды, Университет Лодзи, Польша 
Дата: январь 2016 
Источникhttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4737000/

Ніррорһае rhamnoides л. (облепиха), естественно, происходит по всей Азии и Европе, является членом Еlaeagnaceae семьи []. Из-за ее многочисленных биологических свойств (противоопухолевое, антимикробное, кардиопротекторное) [], Н. rhamnoides используется в традиционной медицине в течение длительного времени []. Это растение широко используется в традиционной Восточной медицине для лечения астмы, кожных заболеваний, заболеваний легких и язвы желудка. Все части с H. rhamnoides, включая фрукты считаются богатым источником различных биологически активных соединений []. Она содержит фенольные соединения, липиды, витамин С, фенольные соединения отвечают за его фармакологической активности [,]. Кроме того, потребление фенольных соединений можно рассматривать как важную стратегию для лечения патологических состояний или задержку их развития, а также для профилактики заболевания во многих парадигм. Эксперименты Экклстон и соавт. [] сообщили, что фруктовые соки из Н. rhamnoides имело защитный эффект против сердечно-сосудистых заболеваний, но механизм полностью не ясен пока. Очень важно, что Н. rhamnoides является одним из самых представительных экономики, культур для своего широкого использования биологического разнообразия и обилия ресурсов [].

В этом исследовании мы сосредоточились на плоды Н. rhamnoides, который мог бы быть очень интересным. Его целью было изучение антиоксидантной активности фенольной фракции от Н. rhamnoides плоды от воздействия сильный биологический окислитель, перекись водорода (Н2О2) или Н2О2/Фе (донорами гидроксильных радикалов), в человеческой плазме липидов и белков. Кроме того, мы определили эффект фенольного экстракта на неферментативного перекисного окисления липидов в покоящихся тромбоцитов и ферментативного перекисного окисления липидов, метаболизма арахидоновой кислоты (измеряется по уровню тиобарбитуровой кислоты реактивные вещества (TBARS)), в крови тромбоцитов, активированных тромбином (как сильный физиологический агонист). Мы также исследовали в vitro влияние тестируемой фракции на супероксид-аниона (О2−∙) производство в интактных тромбоцитов крови и тромбоцитов, активированных тромбином. Экспериментальные модели, используемые в этом исследовании, были похожи на реакции, которые происходят в человеческой плазме и тромбоцитах крови в условиях окислительного стресса или во время активации тромбоцитов. Кроме того, количество тромбоцитов и их активации являются важными в системе гемостаза, а также при различных заболеваниях, то есть сердечно-сосудистых заболеваний. Действие фракции от Н. rhamnoides фрукты был также против деятельности двух фенольных экстрактов: коммерческая экстракт из ягод черноплодной рябины (Aronox) и виноградных косточек экстракт с антиоксидантными и антиагрегантными свойствами []. Диапазоне испытанных концентраций Н. rhamnoides фракции (0.5–50 μг/мл) или двумя другими экстрактами (50 µг/мл) достигается в плазме путем добавки фенольных соединений.

2. Материал и методы

2.1. Химических веществ

Цитохром с, диметилсульфоксиде (ДМСО), тиобарбитуровой кислоты (ТБК), Н2О2и муравьиной кислоты (ЖХ-МС класс) были куплены от Sigma (Сент-Луис, Миссури., США). Метанол (изократическое класс) и ацетонитрила (ЖХ-МС класс) были приобретены у фирмы Merck (Дармштадт, Германия). Все другие реагенты представлены ЧДА и были предоставлены коммерческими поставщиками.

Запас раствора А. рябины экстракт (коммерческий продукт, Aronox, по Адгорһагмбыл Лтд. Польша; номер партии 020/2007k) была сделана в ч.2O при концентрации 5 мг/мл, замораживали, а затем использовали для экспериментов. Общее содержание фенолов в фенольных богатые порошок, используемый в данном исследовании составил 309.6 мг/г экстракта, в том числе фенольные кислоты (изомеры хлорогеновой кислоты), 149.2 мг/г экстракт, антоцианы (гликозиды антоцианы: цианидин 3-galactoside, цианидин 3-глюкозид, цианидин 3-арабинозид, цианидин и 3-xyloside), 110.7 мг/г, флавоноиды (кверцетин гликозиды), 49.7 мг/г экстракта. В ВЭЖХ определение фенольных-богатый экстракт из ягод рябины А. было описано ранее [].

Виноградный экстракт семян был поставлен успокоительных (Германия) с общим содержанием фенольных соединений, равной 500 мг/г экстракта []. Исходный раствор экстракт семян винограда был подготовлен в 50% ДМСО.

2.2. Растительный Материал

Облепиха крушиновидная (Ніррорһае rhamnoides L.) из ягод были получены из садоводческого хозяйства в Сокулка, Подляское воеводство, Польша (53°24 'северной широты, 23°30' в. д.). Фрукты были лиофилизируют и хранят в холодильнике.

2.3. Подготовка фракции Фенольных соединений

Замораживание-высушенные плоды облепихи (800 г) были подвергнуты холодного отжима с 4 л 80% - ного метанола (В/В; 24 ч), помощь при ультразвуковой обработке (2 × 10 мин). Растительный материал был также извлечен с кипящим 80% метанола (В/В; 4 л; 1 ч), при рефлюкс. Оба экстракты были объединены, фильтруют и концентрируют в роторном испарителе (heidolph ротационные, Швабах, Германия) для удаления органического растворителя. Остаток нанести на короткий LiChroprep 40-63 μм РП-18 колонке (Микропористые корп, Бедфорд, Массачусетс) и в равновесии с водой. Колонку промывают водой для удаления крайне полярные экстракт компоненты, и связанные фенольные соединения элюируют с 50% метанола (в/в). Полученные 50% метанольный элюат концентрировали с помощью роторного испарения и затем лиофилизируют, в результате чего 10.19 г сухой фракции фенольных.

2.4. ЖХ-МС Анализ

В состав фракции фенольных плодов облепихи определяли с помощью ВЭЖХ и ESI-МС/МС метода. Хроматографические анализы проводились с применением системы термо Финниган геодезист ВЭЖХ, снабженный детектора и в сочетании с термо-LCQ преимущество Макс ионная ловушка масс-спектрометр. Разделение проводилось на вод XBridge БЕХ С18 колонке (3.0 × 150 мм, 2.5 µм), выдерживают при 50°С. вводимый объем был 5 µл. элюирования (300 μл мин-1) проводилась с градиентом растворителя в (ацетонитрил с 0,1% ФА) в растворителе а (MilliQ воды с 0,1% ФА): 0-5 мин, 5% Б; 5-85 мин, 5-60% Б; 85-95 мин, 60% в. УФ -- Визави спектры были записаны от 200 до 600 нм. Масс-спектральные исследования были выполнены в отрицательной ионизации режим со следующими параметрами: температуры капилляра 260°с, спрей напряжения 3.9 кв, капиллярное напряжение -47 в, тубус смещение -60 в, оболочки газового потока 70 (условных единицах), и зачистка потока газа 10 (в относительных единицах). МС сканирование охватывает диапазон от м/з до 150 м/з 2000; МС/МС спектры были приобретены в зависимости от данных анализа режиме (ДВР). Флавоноиды были идентифицированы на основе их МС и УФ-спектров, а также данные литературы [].

Количественный анализ проводился с использованием УВЭЖХ-УФ-МС методом. Хроматографическое разделение проводили на систем ВЭЖХ хроматограф, состоящий из бинарного растворителя менеджер, пробоотборник, колонка диспетчере, и диодно-матричного детектора (воды, Милфорд, Массачусетс, США), и в сочетании с тройной квадрупольный масс-детектор (колонки acquity TQD, воды). Образцы были разделены на колонки acquity УСЗ С18 (100 × 2.1 мм, 1.8 μм; воды) колонка и поддерживается на уровне 40°С. вводимый объем составлял 2,5 µл. элюирования (400 μл мин-1) проводилась с градиентом растворителя в (ацетонитрил с 0,1% ФА) в растворителе а (MilliQ воды с 0,1% ФА): 0-0.50 мин, 1% Б; 0.50–17.95 мин, 1-35.5% Б; 17.95–18.00 мин, 35.5–99% Б; 18.00–20.00 мин, 99% Б. Капиллярное напряжение составляло 3,0 кв, конус напряжение 40 В, источник температуры 140°с, десольватацию температуры 350°с, конуса поток газа (азота) 100 л ч-1, и десольватацию газового потока 800 л ч-1. КПК обнаружения был использован для количественного анализа фенольных соединений (λ = 350 нм для флавоноидов, 254 нм для других фенольных соединений). Поскольку производные изорамнетина главные флавоноиды, содержащиеся в облепихе, плодах, стандартной Кривой изорамнетин 3-О-β-glucosyl(1→2)-β-galactoside был применен для расчета относительной концентрации индивидуальных флавоноидов и полное содержание других фенольных соединений. Анализы были проведены в трех экземплярах.

Запас решения исследуемой фракции завода было принято в 50% ДМСО. Конечная концентрация ДМСО в пробах была ниже, чем 0.05% и ее эффекты были определены во всех экспериментах.

2.5. Тромбоцитов и плазменных изоляции

Свежей человеческой плазмы была получена от обычных, лекарства-бесплатные доноры в банке крови (Лодзь, Польша). Периферической крови были получены также от некурящих мужчин и женщин (собранных в раствор ДСА (лимонная кислота/цитрат/раствор декстрозы; 5 : 1; В/в; крови/ДСА)). Они не принимали каких-либо лекарств или наркотических веществ (включая табак, алкоголь, противоокислительные добавки, аспирин или другие антитромбоцитарные препараты). Протокол был одобрен Комитетом по исследованиям на людях университета Лодзи количество 2/KBBN-UŁ/с III/2014. Богатой тромбоцитами плазмы (prp) был подготовлен путем центрифугирования свежей человеческой крови при 250 х Г В течение 10 мин при комнатной температуре. Затем тромбоциты осаждают центрифугированием при 500 ×G в течение 10 мин при комнатной температуре. Осадок тромбоцитов был дважды промывают буфером Tyrode (в 10 мм HEPES, 140 мм NaCl, 3 мм Ксl, 0,5 мм MgCl2, 5 мм NaHCO3, 10 мм глюкозы, рН 7,4), после чего тромбоциты были приостановлены в тот же буфер. Концентрация тромбоцитов в суспензии, оцененные спектрофотометрическим методом [], составляла 5 × 108/мл.

Суспензий тромбоцитов крови или плазмы инкубировали (15 или 60 мин, при 37°C) с

  1. Н. rhamnoides доли при окончательной концентрации 0.5–50 μг/мл,
  2. Н. rhamnoides доли при окончательной концентрации 0.5–50 μг/мл плюс 2 мм Н2О2,
  3. Н. rhamnoides доли при окончательной концентрации от 0,5 до 50 μг/мл плюс 4,7 мм H2О2/3.8 mm п2т.4/2,5 мм ЭДТА,
  4. Н. rhamnoides доли при окончательной концентрации от 0,5 до 50 μг/мл и 5 ед/мл тромбина (5 мин, при 37°C),
  5. Черноплодной рябины экстракт или экстракт семян винограда в конечной концентрации 50 μг/мл,
  6. Черноплодной рябины экстракт или экстракт семян винограда в конечной концентрации 50 μг/мл плюс 2 мм Н2О2,
  7. Черноплодной рябины экстракт или экстракт косточек винограда в конечной концентрации 50μг/мл плюс 4,7 мм H2О2/3.8 mm п2т.4/2,5 мм ЭДТА,
  8. Черноплодной рябины экстракт или экстракт косточек винограда в конечной концентрации 50μг/мл и 5 ед/мл тромбина (5 мин, при 37°C).

2.6. Измерение Перекисного Окисления Липидов

Перекисного окисления липидов определяли путем измерения концентрации TBARS. Инкубация плазмы или тромбоцитов в крови (контроль, растительный экстракт И Н2О2или Н2О2/Фе-обработанных плазмой, растительных экстрактов, а также тромбин-лечение тромбоциты) было остановлено путем охлаждения пробы в ледяной бане. Образцы плазмы или тромбоцитов были переведены на равным объемом холодной 20% (объем/объем) трихлоруксусной кислоты в 0,6 м HCl и центрифугировали при 1200 ×G в течение 15 мин. Один том из прозрачного супернатанта смешивали с 0,2 объем 0,12 М тиобарбитуровой кислоты в 0.26 М Трис (рН 7,0), погружают в кипящую водяную баню на 15 мин, а затем оптическую плотность измеряли при 532 нм (Спектрофотометр УФ/ВИС Гелиос Альфа Усикам) []. В TBARS концентрация была рассчитана с использованием молярной экстинкции (ε = 156,000 М-1 см-1).

2.7. Супероксид Анион Измерения

Цитохром с сокращения используется для измерения О2−∙ поколения в контроле и в тромбоциты инкубируют с тестируемой смеси, как описано ранее []. Вкратце, равном объему модифицированного Tyrode буфер, содержащий цитохром C (160 μм), был добавлен к суспензии тромбоцитов. После инкубации тромбоциты осаждают центрифугированием при 2000 ×G в течение 5 мин и супернатант переносили в кюветы. Снижение цитохрома с была измерена спектрофотометрически при 595 нм. Для расчета молярной концентрации О2−∙, молярной экстинкции для цитохрома C от 18,700 М-1 см-1 был использован.

2.8. Измерение Карбонильных Групп

Определение карбонильных групп белков в плазме крови проводилось по методике Далле-Донн и соавт. [].

2.9. Анализ Данных

Статистический анализ был проведен с помощью нескольких тестов. Для того, чтобы устранить неточные данные, то вопрос-Диксон был проведен тест. Все значения в данном исследовании были представлены как среднее арифметическое ± стандартная ошибка (ГП). Статистический анализ проводился с помощью однофакторного ДИСПЕРСИОННОГО анализа для повторных измерений.

3. Результаты

В ЖХ-МС анализ показал, что флавоноиды являются доминирующими соединений фенольной фракции из плодов облепихи и их общая сумма составила 214.04 мг/г (табл. 1). Среди различных флавоновые гликозиды, изорамнетин как 3-О-hexoside-deoxyhexoside и изорамнетин 3-О-hexoside присутствовали в высоких количествах. Другие фенольные соединения, в том числе предполагаемый проантоцианидины, было трудно определить, и большинство из них произошли в низких концентрациях. Их общее содержание измеряется 28.65 мг/г (в изорамнетин 3-О-Кзс(1→2)-Гал эквивалент).

Таблица 1
Содержание флавоноидных гликозидов во фракции фенольных плодов облепихи.

Антиоксидантной деятельности фенольной фракции от Н. rhamnoides фрукты (в диапазоне доз 0.5–50 μг/мл; время инкубации: 15 и 60 мин) были изучены в лабораторных условиях. Как показано на рис Figures11 и А2,2, испытываемой фракции плазмы ингибирует перекисное окисление липидов и карбонилирование белков стимулируется Н2О2 И Н2О2/Фе. Ингибирование перекисного окисления липидов в плазме достигается примерно в 60% при самой высокой концентрации (50 μг/мл) фракции и дольше времени инкубации (60 мин) были применены (рис. 1(А) и 1(Б)).

Рис. 1
Последствия фенольной фракции из плодов Н. rhamnoides (0.5–50 μг/мл; 15 и 60 мин) в плазме перекисного окисления липидов, индуцированного Н2О2 (А) и плазменной перекисного окисления липидов, индуцированного Н2О2/Фе (б). Данные представляют собой средства ± ...
Рис. 2
Последствия фенольной фракции из плодов Н. rhamnoides (0.5–50 μг/мл; 15 и 60 мин) в плазме белка карбонилирование индуцированных Н2О2 (А) и плазменного белка карбонилирование, индуцированных Н2О2/Фе (б). Данные представляют собой средства ...

Еще ряд экспериментов, направленных на определение уровня TBARS как показатель неферментативного перекисного окисления липидов в интактных тромбоцитов в крови и enzymatical перекисное окисление арахидоновой кислоты в тромбоцитах крови, стимулированных тромбином. После 15 мин преинкубации эритроцитов С Н. rhamnoides фенольной фракции, количество TBARS в интактных тромбоцитов и тромбин-активированных тромбоцитов уменьшается. Доля активности был зависимым от концентрации (рис. 3). На самой высокой из исследованных концентраций фракции (50 µг/мл), производства TBARS в покоящихся и активированных тромбоцитов была снижена примерно на 60% (рис. 3).

Рис. 3
Последствия фенольной фракции из плодов с H. rhamnoides (0.5–50 μг/мл, 15 мин) на перекисное окисление липидов в покоящихся тромбоцитов и тромбоцитов, активированных тромбином. Данные представляют собой средства из 3-4 доноров ± ...

Анализ влияния Н. rhamnoides экстракт фенольной (в концентрациях от 0,5 до 50 μг/мл) о сокращении О2−∙) поколения в покоящихся тромбоцитов и тромбоцитов, активированных тромбином показана на рисунке 4. Все исследованные концентрации фенольная фракция сократилась О2−∙ Производство. Сильнейшее торможение наблюдалось в тромбоцитах лечение с максимальной дозы (50 µг/мл) фракции, составлял около 40% для интактных тромбоцитов и около 55% для тромбоцитов, активированных тромбином (Рис. 4).

Рис. 4
Последствия фенольной фракции из плодов с H. rhamnoides (0.5–50 μг/мл, 15 мин) на2−∙ поколения в покоящихся тромбоцитов и тромбоцитов, активированных тромбином. Данные представляют собой средства 4-6 ...

В сравнительных экспериментах фенольной фракции из плодов облепихи (при самой высокой концентрации, 50 μг/мл) оказался более эффективным, чем 50 μг/мл черноплодной рябины экстракт или 50 μг/мл виноградного семени экстракт (цифры (Figures5557).

Рис. 5
Последствия фенольной фракции из плодов Н. rhamnoides (50 µг/мл, 15 мин), А. рябины экстракт (50 µг/мл, 15 мин) и экстракта виноградных косточек (50 µг/мл, 15 мин) в плазме липидов ...
Рис. 6
Последствия фенольной фракции из плодов Н. rhamnoides (50 µг/мл, 15 мин), А. рябины экстракт (50 µг/мл, 15 мин), и экстракта виноградных косточек (50 µг/мл, 15 мин) на autoperoxidation ...
Рис. 7
Последствия фенольной фракции из плодов Н. rhamnoides (50 µг/мл, 15 мин), А. рябины экстракт (50 µг/мл, 15 мин), и экстракта виноградных косточек (50 µг/мл, 15 мин) на2−∙ ...

4. Обсуждение

Фенольные соединения представляют собой вторичные метаболиты растений с антиоксидантными свойствами. Они играют важную роль в адсорбции и нейтрализации активных форм кислорода. Кроме того, фенолы могут выступать в качестве энтеросорбентов для перехода металлических ионов FE2+, железо3+и Cu2+ , которые участвуют в превращении Н2О2 В О И стимуляция перекисного окисления липидов []. Про-или антиоксидантной деятельности фенольной фракции из плодов Н. rhamnoides и их биологическое значение остаются неясными. Только несколько человеческих экспериментов было обнаружено, что изучение влияния Н. rhamnoides на оксидативный стресс, связанный с сердечно-сосудистыми заболеваниями []. Использованные Н. rhamnoides фракции из плодов был испытан в диапазоне доз 0,5–50 μг/мл, что соответствует физиологической спектр фенольных соединений в плазме крови человека. Плазмы и тромбоцитов были использованы в нашем ин витро исследования, поскольку они являются жизненно важными компонентами гемостаза; кроме того, окислительного стресса в плазме крови и тромбоцитов может способствовать развитию сердечно-сосудистых заболеваний. В наших экспериментах, добавление Н2О2 И Н2О2/Фе на человеческую плазму, в результате значительное увеличение уровня окислительного стресса (измеряется TBARS или уровень карбонильных групп). Наши результаты показывают, впервые антиокислительные свойства фенольной фракции от Н. rhamnoides плоды. Проверенные фракции плазмы значительно ингибирует перекисное окисление липидов, индуцированного Н2О2 И Н2О2/Фе.

Образование карбонильных белков является относительно стабильным биомаркера окислительного стресса, в результате аминокислот изменения кислоты (т. е., Лиз, Арг, Цис, чет, или Pro). Карбонилирование белков является неферментных добавлением альдегидов или кетонов в конкретных аминокислотных остатков. В наших экспериментах, фенольная фракция из плодов Н. rhamnoides снизилась концентрация карбонильных групп белков в плазме обрабатывают Н2О2 И Н2О2/Фе. Наши результаты впервые показывают, что фенольные фракции Н. rhamnoides плоды оказывают тормозящее действие не только на перекисное окисление липидов плазмы человека, но и на карбонилирования белков плазмы крови человека. Upadhyay и соавт. [] наблюдали сказал антиоксидантное действие с H. rhamnoides листья. Водный и hypoalcoholic экстракты Х. rhamnoidesбыло цитопротекторное действие в отношении перекиси водорода и гипоксантин-ксантиноксидаза-стимулированной повреждения клеток ВНК-21 клеток. Махешвари и соавт. [] было показано, что фенольные-богатой фракции с H. rhamnoides листьев обладает мощной антиоксидантной активностью, предотвращает окислительное повреждение липидов и белков, и дает значительную защиту от Ккл4-стимулируется окислительное повреждение печени в Спрэг dawley крыс. На основании результатов Хан и соавт. [], можно показать, что Н. rhamnoides экстракт листьев улучшает гамма-излучения-опосредованного повреждения ДНК и печеночные изменения.

Еще один набор наши эксперименты показали, что Н. rhamnoides фракции фенольных может эффективно уменьшить перекисное окисление липидов в тромбоцитах крови. После 15 мин преинкубации эритроцитов с испытываемой фракции, суммы TBARS в покое и тромбин-стимулированные тромбоциты были снижены. Эти результаты показывают, что испытания экстракта может также играть роль в модуляции активации тромбоцитов вмешиваясь в метаболизм арахидоновой кислоты, в котором циклооксигеназы или липоксигеназы принимает участие. Кроме того, тромбоциты сами по себе могут давать несколько Рось, в том числе супероксид-анион, перекиси водорода и гидроксильного радикала []. Показано, что АФК участвуют в передаче сигнала. Изменения в крови тромбоцитов отзывчивость к сильным физиологическим агонистом, тромбин, наблюдались в настоящее время в пробирке исследования, когда тромбоциты были предварительно выдерживают С Н. rhamnoides фракции. Ведь циклооксигеназы участвует в генерации АФК в тромбоцитах, представляется возможным, что исследуемые фракции могут модулировать продукцию АФК вмешиваясь в метаболизм арахидоновой кислоты, в которой этот энзим принимает участие. Однако, результаты, полученные Экклстон и соавт. [] показали, что никаких существенных изменений в агрегации тромбоцитов между группами лечения (двадцать здоровых мужчин-добровольцев выдавали либо плацебо, либо с H. rhamnoides сока в течение 8 недель). С другой стороны, Н. rhamnoides масло семян обладает антиатерогенным и кардиопротекторное действие []. Кроме того, антигипертензивный эффект флавоны, извлеченный из семян остатки с H. rhamnoides в сахарозо-кормили крыс наблюдалось компанией pang и соавт. [].

Кроме того, мы изучили влияние испытуемых фракции на2−∙ Производство в покоящихся тромбоцитов. Доли выставлены антиоксидантной активностью не только в тромбоцитах крови, активированного тромбином, а также в тромбоцитах отдыхает. Наши результаты также показали, что фенольные фракции от Н. rhamnoides плоды имеют большую антиоксидантную активность, чем экстракты из черноплодной ягод и семян винограда. Можно предположить, что различия в их химических веществ (суммарная концентрация фенольных смол для черноплодной рябины экстракт ягод 309.6 мг/г экстракт; суммарная концентрация фенольных соединений для виноградных косточек экстракт, 500 мг/г экстракт; суммарная концентрация фенольных смол для Н. rhamnoidesфрукты фракции, 242.69 мг/г экстракт) можно объяснить тем сильнее действие с H. rhamnoidesфракции. Основных фенольных соединений Н. rhamnoides фракции являются флавонолы. Флавоновые гликозиды, изорамнетин 3-О-hexoside-deoxyhexoside и изорамнетин 3-О-hexoside, присутствовали в высоких концентрациях. Teleszko и соавт. [] также определены в Х. rhamnoidesплоды флавонолов в качестве основных групп фенольных соединений. Мы полагаем, что эти фенольные соединения могут выступать в качестве основных антиоксидантов В Н. rhamnoidesфракции. Важно отметить, что других протестированных экстрактов не этих соединений. Таким образом, влияние различных фенольных соединений, которые, изорамнетин 3-О-hexoside-deoxyhexoside и изорамнетин 3-О-hexoside, которые могут быть ответственны за антиоксидантное и антиагрегантное действие, остается исследовать. Кроме того, результаты luo и соавт. [] указывают на то, что изорамнетин тормозил развитие атеросклеротической бляшки посредством фосфатидилинозитол-3-киназы/протеин киназы активации B и индукции гемоксигеназы.

Наши результаты показывают, что Н. rhamnoides фракции, как черноплодной , ягод, экстракт виноградных косточек, экстракт отображает множественное влияние на тромбоциты. Н. rhamnoidesфракции может модулировать сигнал трансдукции в разных, иногда даже противоположных путей. Во-первых, он вызывает изменения уровня активных форм кислорода в тромбоцитах. Во-вторых, он регулирует метаболизм арахидоновой кислоты (вероятно, ингибированием циклооксигеназы активность). Тем не менее, он также может изменить экспрессию рецепторов и активности различных ферментов, участвующих в активации тромбоцитов.

Доля Н. rhamnoides фрукты по сравнению с известным черноплодной рябины ягоды могут быть хорошим источником активных веществ, фармакологических или косметических применений. С экономической точки зрения, это правда, что Н. rhamnoides фрукты закупочная цена примерно в четыре раза выше, чем Черноплодная ягоды цена, но урожайность на гектар Н. rhamnoides фрукты в четыре раза больше за то же время. Наши предварительные исследования показывают, что Н. rhamnoides листья содержат качественно те же соединения, как и их плоды. Как плоды собирают вместе с листьями и ветками, на которых они растут, есть возможность получения дополнительно фенольных соединений из листьев в качестве отходов производства.

Наше исследование доказывает, что Н. rhamnoides фрукты могут использоваться в качестве природного источника антиоксидантов и соединений с антиагрегантной активностью для профилактики и/или лечения нарушений, связанных с окислительным стрессом и изменения в тромбоцитарной активации. Кроме того, это дает надежду на разработку новых пищевых добавок, и поэтому эксперименты с плодом Н. rhamnoides должна быть продолжена. Мы планируем для идентификации отдельных или групп фенольных соединений, которые отвечают за антиоксидантные и антиагрегантные свойства Н. rhamnoides фракции.

Благодарности

Эта работа была поддержана Грантом 506/1136 из Университета города Лодзь. Авторы также хотели бы поблагодарить Катажина Липская и Марек Pawlonka из VF-концепции компании (Янув-Любельский, Польша) на поставку плодов облепихи.

Конфликт интересов

Авторы декларируют отсутствие конфликта интересов.

Ссылки

1. Панг Х., Чжао Я., Чжан У., и соавт. Антигипертензивный эффект полного флавоны, извлеченный из семян остатки Ніррорһае rhamnoides L. в сахароза-кормили крыс. Журнал Ethnopharmacology.2008;117(2):325-331. дой: 10.1016/J.джеп.2008.02.002. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
2. Ченг т., ли т. Защитное действие масла семян облепихи rhamnoides L. в (ч) против экспериментальное повреждение печени у мышей. Yufang Ворота Zhonghua Yixue Zazhi.1992;26:227-229. [В pubmed]
3. Гао Х., Ohlander М., сайту jeppsson Н., Бьорк л., Трайковский в. изменение антиоксидантного эффектов и их отношение к фитонутриентов в плодах облепихи (Ніррорһае rhamnoides L.) в период созревания. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии2000;48(5):1485-1490. номер doi: 10.1021/jf991072g. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
4. Слейман Х., Demirezer л., Bykokuroglu М. Е., и соавт. Язвозаживляющий эффект Ніррорһае rhamnoides л. фитотерапия исследований2001;15(7):625-627. дои: 10.1002/ПТР.831. [В Pubmed][Перекрестная Ссылка]
5. Малиновская П., Олас Б. облепиха—ценное растение для здоровья. Космос2016;(1)
6. Shivapriya С., Ilango К., Дубей г. П. Оценка антиоксидантного и нейропротективного эффектаНіррорһае rhamnoides (L.) на окислительный стресс-индуцированную цитотоксичность в человеческих эмбриональных клеточных линий IMR32. Саудовская журнал биологических наук.2015;22(5):645-650. дой: 10.1016/J.sjbs.2015.04.011. [РМС бесплатно статьи] [в pubmed][перекрестная ссылка]
7. Адррес rongsen л. МЦКОГР непериодическая. 20. Катманду, Непал: Международный центр по комплексному освоению горных районов; 1992. Облепиха: универсальный растений для хрупких гор.
8. Кулиев В. Б., Гуль М. Йилдирим А. Ніррорһае rhamnoides л.: хроматографических методов определения химического состава, применения в традиционной медицине и Фармакологические эффекты. Журнал хроматографии Б: аналитических технологий в области Биомедицины и наук о жизни2004;812(1-2):291-307. дой: 10.1016/J.jchromb.2004.08.047. [В Pubmed][Перекрестная Ссылка]
9. Upadhyay Н. К., Кумар р., Сиддики М. С., Гупта А. механизм ранозаживляющего действияНіррорһае rhamnoides л. листьев экстракт в экспериментальных ожогах. Доказательная Комплементарная и Альтернативная Медицина2011;2011:9. номер doi: 10.1093/есам/nep189.659705 [ЧВК бесплатно статьи] [в pubmed] [перекрестная ссылка]
10. Ян Ф. Ю. цюань, Чжан т. Ю., Ито Ю. Многомерные противоточного хроматографа и его применение. Журнал Хроматографическая1998;803(1-2):298-301. дои: 10.1016/S0021-9673(97)01273-9. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
11. Экклстон С., Baoru Ю., Tahvonen р., Каллио, Х., г. Х. Римбах, Minihane А. М. влияние богатой антиоксидантами сок (облепиха) на факторы риска ишемической болезни сердца у людей. Журнал пищевой биохимии2002;13(6):346-354. дои: 10.1016/s0955-2863(02)00179-1. [В Pubmed][Перекрестная Ссылка]
12. Лю Ю., лиан Ю.-С., Я. Ван-л., л. М.-Х., Сяо П.-г. Обзор исследований и разработок и значительный эффект Ніррорһае rhamnoidesЧжунго Zhongyao Zazhi2014;39(9):1547-1552. дой: 10.4268/cjcmm20140901. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
13. Kędzierska М., Олас Б., Wachowicz Б., и соавт. Экстракт из ягод черноплодной рябины модулирует генерацию супероксидного анион-радикалов в тромбоцитах крови у больных раком молочной железы. Планта Медика2009;75(13):1405-1409. номер doi: 10.1055/с-0029-1185718.[В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
14. Олас Б., Wachowicz Б., Новак П., и соавт. Исследование антиоксидантных свойств полифенолов-экстракт из ягод черноплодной рябины в крови тромбоцитов. Журнал физиологии и фармакологии.2008;59(4):823-835. [В pubmed]
15. Олас Б., Wachowicz в., Томчак А., Эрлер И., Stochmal А., Олешек в. Сравнительный анти-тромбоцитов и антиоксидантным свойствам богатый полифенолом экстракт из ягод черноплодной рябины, семян винограда и коры Юкки шидигера в пробиркеТромбоциты2008;19(1):70-77. дои: 10.1080/09537100701708506. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
16. Реш Д., Krumbein А., Mügge С., крох л. в. структурные исследования флавоноидных гликозидов из облепихи (Hippophaë rhamnoides) выжимки по ЯМР-спектроскопии и ВЭЖХ-ЭСИ-МС н. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии2004;52(13):4039-4046. номер doi: 10.1021/jf0306791.[В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
17. Фанг р. Вейч Н. С., Кайт г. С., Портер А. е., Симмондс М. С. Ю. расширенного профилирования флавоноидных гликозидов в плодах облепихи (Ніррорһае rhamnoidesжурнал сельскохозяйственной и пищевой химии2013;61(16):3868-3875. номер doi: 10.1021/jf304604v. [В Pubmed][Перекрестная Ссылка]
18. Walkowiak Б., Михалак е., Koziolkiewicz в., Cierniewski С. С. быстрый фотометрический метод определения количества тромбоцитов в плазме крови или суспензии тромбоцитов. Тромбоз Исследований1989;56(6):763-766. дои: 10.1016/0049-3848(89)90294-6. [В Pubmed][Перекрестная Ссылка]
19. Wachowicz Б. Аденин нуклеотидов в тромбоцитах птиц. Клетки Биохимия и функция.1984;2(3):167-170. дои: 10.1002/бнв.290020310. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
20. Набавить С. М., Набавить С. Ф., Эслами С., Могаддам Х. А. В естественных условиях защитный эффект кверцетина против натрия фторид-индуцированного оксидативного стресса в ткани печени.Пищевая Химия2012;132(2):931-935. дой: 10.1016/J.организм.2011.11.070. [Перекрестная Ссылка]
21. Олас Б., Żbikowska Х. М., Wachowicz Б., Краевский т. Buczyński А., Magnuszewska А. Ингибирующее влияние ресвератрола на генерацию свободных радикалов в крови тромбоцитов.Отель Acta Biochimica Polonica1999;46(4):961-966. [В pubmed]
22. Wachowicz Б., Олас Б., Zbikowska Х. М., Buczynski А. Генерация активных форм кислорода в крови тромбоцитов. Тромбоциты2002;13(3):175-182. дои: 10.1080/09533710022149395. [В Pubmed][Перекрестная Ссылка]
23. Далле-Донн И., Росси р., Giustarini Д., Milzani А. Коломбо, р. белковых карбонильных групп в качестве биомаркеров оксидативного стресса. Клиника Сайт Chimica Acta По2003;329(1-2):23-38. дои: 10.1016/s0009-8981(03)00003-2. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
24. Новак Д. растительный антиоксидант полифенол и когнитивных расстройств. В: Дитрих-Muszalska А., Чаухан в., С. Гриньон, редакторы. Окислительного стресса в прикладных исследованиях и клинической практике. Хумана Пресс; 2015. с. 521-553. (Исследования о психических расстройствах).
25. Sayegh М., Мильо в., Рей С. потенциал сердечно-сосудистые последствия облепихи потребления у людей. Международном журнале пищевых наук и питания2014;65(5):521-528. номер doi: 10.3109/09637486.2014.880672. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
26. Махешвари т. д., Йогендра Кумар М. С., Верма С. К., Сингх в. К., Сингх С. Н. Антиоксидантные и гепатопротекторные деятельности фенольных богатой фракции облепихи (Ніррорһае rhamnoidesL.) в листьях. Пищевой и химической токсикологии2011;49(9):2422-2428. дой: 10.1016/J.ПКТ.2011.06.061. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
27. Хан А., Манна К., Дас Д. К., и соавт. Seabuckthron (Ніррорһае rhamnoides L.) лист экстракт улучшает гамма-излучения опосредованного повреждения ДНК и печеночные изменения.Индийский журнал экспериментальной биологии2014;52(10):952-964. [В pubmed]
28. Яна Б., Ганча г. М. кислородных радикалов в тромбоцитах человека: зависимость от 12-липоксигеназы активности и на глутатион цикла. Международные Архивы аллергии и иммунологии.1990;93(1):73-79. номер doi: 10.1159/000235282. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
29. Басу М., Прасад р., Jayamurthy П., приятель К., Arumughan С., Сохнем р. С. антиатерогенных эффектов облепихи (Hippophaea rhamnoides) масло. Фитомедицина2007;14(11):770-777. дой: 10.1016/J.phymed.2007.03.018. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
30. Teleszko М., Wojdyło А., Rudzińska М., Oszmiański Дж., Голис т. Анализ липофильных и гидрофильных биоактивных компонентов в содержание облепихи (Ніррорһае rhamnoides L.) из ягод. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии2015;63(16):4120-4129. номер doi: 10.1021/САУ.jafc.5b00564. [В Pubmed] [Перекрестная Ссылка]
31. Ло Я., солнце г., Донг Х., и соавт. Изорамнетин ослабляет развитие атеросклероза, предотвращая апоптоз макрофагов через PI3K/акт активации и хо-1 индукции. Биохимия2015;10(3):19. номер doi: 10.1371/журнал.пон.0120259.e0120259 [ЧВК бесплатно статьи] [в pubmed] [перекрестная ссылка]
Яндекс.Метрика

Оставить комментарий

Комментарии: 0